肽聚糖类型鉴定 (DAP类型分析)

Published at 2021-03-17 19:54

Author：jiangxw

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  • 菌体的培养与收集 ：通过离心收集菌体，离心后室温风干，将干菌体置于 4 ℃冰箱中保存。
  • 菌体水解：取少量菌体装入硬质安瓿管中，加入 6 mol/L HCl 0.3 ml，封口，120 ℃（砂浴）水解 12 h 左右；
  • 点样 ：取用于氨基酸分析的水解液在纤维素板上点样 (毛细吸管约5-10次，依样品浓度而定)， 标准品 0.01 mol/ml DAP （同时含有 L-DAP，meso-DAP 和 D-DAP）(毛细吸管约 10 次左右)； （0.01 mol/ml DAP 的配制：用0.1 mol/ml HCL 稀释原溶液）
  • 展层 ：展层系统为甲醇：吡啶：冰乙酸：水=10：1：0.25：5（V/V）。上行法展层；
  • 显色： ：氨基酸分析用 0.4% 茚三酮丙酮溶液，100~110 ℃加热 2~3 min（蓝色）， 结果如图示。